Comparative analysis of two immunohistochemical methods for antigen retrieval in the optical lobe of the honeybee Apis mellifera: Myosin-v assay

The present study compared two heating methods currently used for antigen retrieval (AR) immunostaining: the microwave oven and the steam cooker. Myosin-V, a molecular motor involved in vesicle transport, was used as a neuronal marker in honeybee Apis mellifera brains fixed in formalin. Overall, the steam cooker showed the most satisfactory AR results. At 100 ºC, tissue morphology was maintained and revealed epitope recovery, while evaporation of the AR solution was markedly reduced; this is important for stabilizing the sodium citrate molarity of the AR buffer and reducing background effects. Standardization of heat-mediated AR of formalin-fixed and paraffin-embedded tissue sections results in more reliable immunostaining of the honeybee brain.

Análise videodensitométrica da placa carotídea vulnerável: correlação histopatológica / Videodensitometric analysis of vulnerable carotid plaque: correlation with histological examination

Objetivos: Estabelecer a correlação entre a avaliação quantitativa, através da caracterização tecidual videodensitométrica, de imagens ultra-sonográficas bidimensionais digitalizadas e a análise histopatológica de placas carotídeas vulneráveis removidas cirurgicamente da artéria carótida, com estenose acima de 70 por cento, foram submetidos à caracterização tecidual ultra-sônica da placa antes do procedimento cirúrgico. Um software de computador (CaPAS - Carotid Plaque Analysis Software) foi especificamente desenvolvido para a análise videodensitométrica das imagens bidimensionais digitalizadas das placas carotídeas através de índice estatísticos de primeira (NMC - nível médio de cinza e DP - desvio padrão) e segunda (Entopia, Energia e Homogeneidade) ordens. Os pacientes foram divididos em 3 grupos de acordo com a sintomatologia: GRUPO I(n igual 6), pacientes com sintomas até 3 meses antecedendo o procedimento cirúrgico, GRUPO II(n igual 9), pacientes com sintomas acima de 3 meses antecedendo o procedimento cirúrgico e GRUPO III(n igual 10), pacientes assintomáticos. Os espécimes cirúrgicos foram analisados histopatologicamente para determinar as percentagens de gordura/necrose, fibrose e cálcio. Resultados: O NMC (primeira ordem) e os parâmetros de segunda ordem (entropia, energia e homogeneidade) diferenciaram os grupos clínicos, mas não se correlacionaram com os achados histopatológicos, mostrando apenas um tendência no NMC (primeira ordem) em refletir tais achados. Conclusão: A análise videodensitométrica de imagens bidimensionais digitalizadas pode ser usada para identificar placas vulneráveis e potencialmente instáveis, porém não se correlaciona com a proporção de componentes estruturais básicos avaliados histologicamente.

Caracterização tecidual ultra-sônica da placa carotídea vulnerável pela análise videodensitométrica / Ultrasonic tissue characterization of vulnerable carotid plaque by videodensitometric technique

A ruptura de placas carotideas e embolização de material atero-trombótico é o mecanismo patogênico mais comum causador de isquemia cerebral devido à estenose de artéria carótida. Vários trabalhos multicêntricos e randomizados demostraram o benefício da cirúrgia de endarterectomia da artéria carótida (CEAC) em prevenir acidente vascular cerebral(AVC) tanto em pacientes sintomáticos quanto assintomáticos. Entretanto, estes mesmos trabalhos também notaram que a maioria dos pacientes portadores de estenoses significativas das artérias carótidas permaneceram livres de eventos neurológicos apenas com a terapia medicamentosa e que um grande número e pacientes pode ser operado desnecessariamente. Assim, é necessário identificar pacientes com alto risco, em que a CEAC deve ser considerada, e pacientes com baixo risco os quais devem ser poupados deste procedimento frequentementee custoso e não isento de riscos. Estudos histológicos têm demonstrado que um núcleo lipídico grande, localizado próximo ao lúmen, com ruptura da capa fibrosa, hemorragia intraplaca e ulceração da superfície ocorrem mais frequemtemente em placas sintomáticas. A caracterização quantitativa desses achados histológicos através de métodos não invasivos permitirá que a CEAC seja realizada em pacientes portadores de placas de alto risco. O método videodensitométrico é uma técnica promissora que pode identificar placas carotídeas e potencialmente instáveis.